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因條件限制，實驗時從動物房取組織后到細胞間做實驗需15分鐘。組織是否會失去活性而導致類器官培養失敗？

jie*** 瀏覽：638 評論：0 2023-04-06

根據經驗，將組織浸沒在pbs中保持4°C左右低溫，4H內組織具有形成類器官的能力。
氣道上皮類器官類器官有哪些具體方面的應用？

jie*** 瀏覽：506 評論：0 2023-04-06

氣道上皮類器官可用于各種呼吸道疾病的研究。在science和nature期刊有許多這方面文獻。
為什么要避免類器官分化?

jie*** 瀏覽：567 評論：0 2023-04-06

需要避免的并非類器官分化，而是類器官的不定向分化。若是在還需擴增時期類器官提前分化了，則類器官生長速度將大幅減慢若是分化時不按定向目標分化，培養出的類器官可能并非目標類器官。則繼續培養就沒了意義。這也是我們為什么必須要選擇優秀基質膠。
若無可一邊培養類器官一邊實時觀察細胞生長情況的顯微鏡，如何確保每次觀察比對的都是同一個視野?

jie*** 瀏覽：553 評論：0 2023-04-06

可以選擇一個優秀的視野，并在該視野下用標記筆在孔板底部做上標記，往后觀察只需找到這個標記調節焦距即可。
在培養類器官時，為什么要盡量避免類器官“貼壁”

jie*** 瀏覽：624 評論：0 2023-04-06

培養類器官培養時，在基質膠的支撐下，細胞可維持3維結構生長。成為一個個三維結構的細胞團，并以此模擬體內的生長環境。此時若是類器官“貼壁”生長，則基質膠無法良好地達成對細胞的支撐作用。而“貼壁”生長的細胞所分化形成的細胞團，不僅無法良好地模擬體內的生長環境，同時產生不同的組織特性，難以重現器官的生理功能。
種板后為什么要倒扣培養板進行孵化?

jie*** 瀏覽：584 評論：0 2023-04-06

在基質膠孵育時倒扣細胞可以較好地避免細胞“貼壁”，同時若膠比較稀時細胞會因重力緣故沉底。倒扣培養板可使細胞不沉底避免細胞貼壁導致的無法形成良好的類器官結構。翻轉過程不可用力過猛，以免基質膠受力“貼壁”。
氣管類器官原代建立時雜細胞與氣管碎片極多，有什么方法可以將它們除去呢? 可以使用更小孔徑的濾網嗎?

jie*** 瀏覽：602 評論：0 2023-04-06

氣管類器官原代建立時不可避免的會有許多的雜細胞和氣管碎片。若是紅細胞，種板前在細胞懸液中加入紅細胞裂解液后離心，棄上清，即可除去。而氣管碎片則在類器官傳代時便可去除。不建議用更小孔徑的濾網過濾細胞懸液，過小的濾網孔徑在阻擋雜細胞與氣管碎片時也會阻擋目標細胞團。進行種板的細胞若是太小或是為單細胞，則類器官成活率低、生長慢。據過往實驗培養效果，100um為該步驟濾網最佳孔徑。
氣管類器官培養的是哪種細胞? 實驗時取用的小鼠氣管組織這么小，有足夠的成體干細胞嗎?

jie*** 瀏覽：482 評論：0 2023-04-06

氣管類器官培養的是氣管上皮細胞，原代建立實驗收集的氣管上皮細胞比較少只能支持48孔板種板3~6孔左右。
怎么保證提出來的細胞純度及其活力呢?

jie*** 瀏覽：565 評論：0 2023-04-06

氣管原代建立難以保證細胞的純度，經過傳代后類器官的純度會增加。
腫瘤類器官實驗按步驟消化后細胞成活率大概多少？

jie*** 瀏覽：492 評論：0 2023-04-06

這主要取決于目標腫瘤組織，一般正常操作成活率達到九成以上。

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