ABW基質膠分裝

操作步驟

1、收貨時，首先確認還有干冰，ABW基質膠成固態，液面水平，如有異常請及時拍照取證并聯系我們。

2、整個ABW基質膠只能分裝一次，分裝前，先放在4℃冰箱，待之融化(切記不要放在冰箱門上或者是經常要敞開口取放試劑的冰箱)。整個分裝過程要在預冷分裝盒上進行。該次實驗用不完的基質膠可以放在4℃存放兩周；分裝時不做稀釋，以原液形式保存。

3、將所需要的實驗物品：預冷分裝盒、槍頭預冷盒等全部用75%酒精消毒后置于超凈工作臺內。（預冷分裝盒、槍頭預冷盒事先裝好槍頭和1.5毫升EP管，高壓滅菌后于-20度預冷）

4、超凈工作臺紫外滅菌15分鐘以上。

5、將凍存管或1.5毫升EP管取出，做好標記。

6、將凍存管或1.5毫升EP管做好標記后，打開蓋子，注意不要碰到管口。

7、根據每次實驗用量分裝ABW基質膠，盡量一管為一次實驗用量（注意操作時避免袖子不斷經過敞口容器上方）。

8、蓋好蓋子，置于凍存盒或其他合適的容器中，用冰盒轉移，防止傾倒，置于-20℃冰箱中保存，若兩周內使用，則置于預冷分裝盒4℃冰箱內保存即可。

 

 

一些注意事項：

1、實驗人員的手心不要接觸基質膠，如：要手持裝有matrigengel matrix的EP管的上方，防止體溫使基質膠成膠凝固；

2、普通 matrigengel matrix 的濃度是8-12mg/ml，高濃度的matrigengel matrix的濃度是16-24mg/ml，具體濃度可通過貨號查詢；

3、以24孔板為例，做腫瘤細胞侵襲實驗時每孔加入matrigengel matrix 20-30ug(一般配成200-300ug/ml 的工作濃度，然后每孔加入100ul即可)。此時，matrigengel matrix是稀釋到很低的倍數(有的實驗需要低至30倍稀釋，具體最適濃度需根據自己的實驗進行優化)。鋪膠后置于37℃培養箱放置1小時，取出后如果上層有液態培養基，需小心棄去上層的液態培養基即可使用(此時matrigengel matrix沉在底部形成一小薄層)；

4、做內皮細胞的成管實驗一般把高濃度的matrigengel matrix (16-24mg/ml)稀釋到10mg/ml，由于普通濃度的matrigengel matrix (8-12mg/ml)的濃度接近10mg/ml，所以也可用作成管實驗；

5、基質膠跟培養基混合時請使用渦旋儀以確保能夠均勻混合。