模基生物小鼠肝膽管類器官培養(yǎng)基套裝（分化）

產(chǎn)品描述

廈門模基生物小鼠肝膽管類器官培養(yǎng)基套裝（分化）是一種化學(xué)定義的細(xì)胞培養(yǎng)基，用于建立和培養(yǎng)從成體干細(xì)胞衍生的小鼠肝膽管類器官。肝膽管的自我更新上皮細(xì)胞是由位于肝臟的干細(xì)胞及其祖細(xì)胞的增殖所驅(qū)動的。肝膽管類器官因其上皮在結(jié)構(gòu)、細(xì)胞類型組成和自我更新動力學(xué)方面的表現(xiàn)，而具有真實器官的特征。肝膽管類器官可以在分化培養(yǎng)基中誘導(dǎo)出肝樣細(xì)胞，為人類肝臟發(fā)育和疾病的研究提供了前所未有的模型。

產(chǎn)品信息

其他自備材料和試劑

MG&ABW基質(zhì)膠

組織消化液

上皮類器官基礎(chǔ)培養(yǎng)基

類器官消化液

小鼠肝膽管(擴增)類器官培養(yǎng)基

類器官冷凍保存培養(yǎng)基(無血清)  

DPBS (1X)，液體，不含鈣和鎂  

FBS（胎牛血清）

EDTA

小鼠肝膽管(分化)培養(yǎng)基的制備

使用無菌操作技術(shù)配制小鼠肝膽管(分化)類器官的擴增或分化培養(yǎng)基。以配制 10 mL 為例配置小鼠肝膽管(分化)類器官擴增或分化培養(yǎng)基， 如所需量不同，可相應(yīng)調(diào)整用量。

1. 冰上解凍 Mouse Liver Ductal Organoid Supplement B (50x)，Mouse Liver Ductal Organoid Supplement C (250x)和 Mouse

Colonic Organoid Supplement D (250x)。

2. 小鼠肝膽管類器官的分化培養(yǎng)基I：將200 μL Mouse Liver Ductal Organoid Supplement B(50x) (Differentiation), 40 μL Mouse Liver Ductal Organoid Supplement C (250x) (Differentiation) 加 至 10 mL 小鼠肝膽管類器官基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，充分混合。

4. 小鼠肝膽管類器官的分化培養(yǎng)基II：將 200 μL Mouse Liver Ductal Organoid Supplement B (50x)，40 μL Mouse Liver Ductal Organoid Supplement C (250x)，10 μL Mouse Liver Ductal Organoid Supplement D (250x) (Differentiation)加至 10mL Mouse Liver Ductal Organoid Basal Medium 中，充分混合。

 注意：配制后的小鼠肝膽管類器官培養(yǎng)基可在 2 - 8°C 儲存 10 天。此外，Mouse Liver Ductal Organoid Supplement B(50x)內(nèi)含有細(xì)菌及真菌抗生素(50x)。

小鼠肝膽管(分化)類器官的培養(yǎng)

1.  在小鼠肝膽管類器官培養(yǎng)基中培養(yǎng)小鼠肝膽管類器官至少3天。

2.  將培養(yǎng)基改為小鼠肝膽管類器官分化培養(yǎng)基I，培養(yǎng)9 d。在這期間，每天更換培養(yǎng)基。

3. 將培養(yǎng)基改為小鼠肝導(dǎo)管類器官分化培養(yǎng)基II，培養(yǎng)3天。在這期間，每天更換培養(yǎng)基。

4. 在這個階段結(jié)束時，分化過程就完成了。肝膽管類器官會分化成表達(dá)白蛋白、Ttr、Cyp3a11和Mup20等肝臟標(biāo)志物的肝細(xì)胞樣器官。